Az XTT teszt az XTT sárga tetrazóliumsó hasításán alapul, narancssárga, vízben oldódó formazántermékké, dehidrogenáz aktivitással az aktív mitokondriumokban.
Az életképes sejtek számának csökkenése a mintában lévő mitokondriális dehidrogenázok általános aktivitásának csökkenését okozza. Ez a redukció közvetlenül függ a képződött narancssárga formazán mennyiségétől, amelyet az abszorpció figyelhet meg.
Az XTT teszttel a sejtek proliferációját és a sejtek életképességét a vizsgálandó anyaggal végzett kezelés után kolorimetriásan határozzuk meg.
|
protokoll |
|
|
Sejtvonal |
L929 sejtek (ATCC CCL1 sz., NCTC 929 klón (kötőszöveti egér), az L törzs klónja (DSMZ) |
|
elemzés |
Az XTT teszt az XTT sárga tetrazóliumsó hasításán alapul, narancssárga, vízben oldódó formazántermékké, dehidrogenáz aktivitással az aktív mitokondriumokban. |
|
Koncentrációk |
4 vizsgálati kivonat koncentráció: 29.6%, 44.4%, 66.7% és 100% |
|
Kivonási idő |
37-1 óra 4 ± 72 ° C-on - 4 óra (rövid érintkezés és ép bőr vagy nyálkahártya) |
|
Lappangási időszak |
37-1 óra 24 ± 72 ° C-on |
|
Minőségellenőrzések |
Oldószer-kontroll: DMEM 10% FBS Negatív kontroll: 10% FBS-ben DMEM-ben extrahált polipropilén Pozitív kontroll: latex, 10% FBS-ben extrahálva |
|
Adatszállítás |
A mitokondriális dehidrogenáz aktivitását abszorpcióval határozzuk meg 450 nm-en (referencia hullámhossz 650 nm). |
|
Pozitív előrejelzés |
A 70% alatti dehidrogenáz aktivitás a kezeletlen kontroll tenyészetekhez képest (oldószeres kontroll) egyértelmű citotoxikus hatásnak tekinthető. |
EUROLABjelentési és tanúsítási tevékenységek, Vállalkozási Akkreditációs Alapítvány (EAF) intézménye által biztosított akkreditáció alapján. Vállalati Akkreditációs Alapítvány (EAF) ISO/IEC 17025 laboratóriumi akkreditációs szolgáltató egyidejűleg; Az Egyesült Nemzetek Szervezetének (UN GLOBAL COMPACT) aláírója.
