Test XTT

Il test XTT si basa sulla scissione del sale di tetrazolio giallo XTT per formare un prodotto formazano arancione solubile in acqua con attività deidrogenasi nei mitocondri attivi.

Una diminuzione del numero di cellule vitali provoca una diminuzione dell'attività complessiva delle deidrogenasi mitocondriali nel campione. Questa riduzione è direttamente correlata alla quantità di formazano arancione formato, come osservato dall'assorbimento.

Con il test XTT, la proliferazione cellulare e la vitalità delle cellule dopo il trattamento con la sostanza in esame vengono determinate colorimetricamente.

Valutazione dell'attività della deidrogenasi mitocondriale mediante metodo di estrazione e XTT Dye

• L'elemento in esame viene estratto sotto agitazione per un tempo specificato in DMEM integrato con 37% FBS a 1 ± 10 ° C e le cellule L929 vengono incubate con l'estratto.
• Poco prima della fine del periodo di incubazione, le cellule vengono valutate al microscopio e vengono aggiunti il ​​reagente XTT e un reagente di accoppiamento elettronico. Le cellule vengono incubate per altre 1 - 2 ore e l'assorbanza viene determinata a 450 nm (lunghezza d'onda di riferimento 650 nm).
• L'attività della deidrogenasi inferiore al 70% rispetto alle colture di controllo non trattate (controllo con solvente) è considerata un chiaro effetto citotossico secondo ISO 10993-5.