Test di concentrazione battericida minima (MBC)

Test di concentrazione battericida minima (MBC)

Il test MBC determina la concentrazione più bassa alla quale un agente antimicrobico ucciderà un dato microrganismo. L'MBC viene determinato utilizzando una serie di passaggi eseguiti dopo il completamento del test della concentrazione minima inibente (MIC).

Test di concentrazione battericida minima (MBC)

Il test MBC è utile per confrontare l'attività di uccisione dei germi di diversi agenti antimicrobici contemporaneamente.

RIEPILOGO DEL TEST DI CONCENTRAZIONE BATTERICA MINIMA

  • Coltura pura di un microrganismo specifico cresciuto durante la notte, quindi diluito a una concentrazione compresa tra 1 x 10 ^ 5 e 1 x 10 ^ 6 ufc / ml in brodo promotore della crescita (tipicamente Mueller Hinton Broth).
  • La diluizione stock della sostanza in esame antimicrobica viene eseguita a circa 100 volte la MIC prevista (se nota).
  • Inoltre, diluizioni 1: 1 vengono effettuate in provette o in piastre per microtitolazione da 96 pozzetti.
  • Tutte le diluizioni dei prodotti in esame vengono inoculate in volumi uguali del microrganismo specificato.
  • Una provetta o pozzetto di controllo positivo e negativo è inclusa per ciascun microrganismo in esame per mostrare un'adeguata crescita microbica durante il tempo di incubazione e la sterilità del terreno, rispettivamente.
  • Una parte del controllo positivo viene piastrata e utilizzata per stabilire una concentrazione di base del microrganismo utilizzato.
  • Le provette o le piastre per microtitolazione vengono quindi incubate alla temperatura e al tempo appropriati.
  • La torbidità indica la crescita del microrganismo e la MIC è la concentrazione più bassa alla quale non si osserva crescita visiva.
  • Per determinare l'MBC, almeno due delle diluizioni che rappresentano la MIC e le diluizioni del prodotto in esame più concentrate vengono piastrate e numerate per determinare CFU / ml vitali.
  • MBC è la concentrazione più bassa che mostra una diminuzione predeterminata di CFU / ml (come il 99.9%) rispetto alla diluizione MIC.

PUNTI DI FORZA DEL TEST DI CONCENTRAZIONE BATTERICA MINIMA DAL

  • Il test MBC consente di determinare la concentrazione minima di agente necessaria per ottenere un effetto battericida. Tuttavia, va notato che il tempo che l'antimicrobico è a contatto con l'organismo in esame è piuttosto lungo, circa 18 ore per questo metodo. Pertanto, il test determina realmente la concentrazione minima richiesta per uccidere l'organismo in esame, poiché tutti gli altri parametri sono favorevoli all'effetto biocida. 
  • Il test MBC può essere uno strumento valido e relativamente poco costoso per selezionare un gran numero di agenti antimicrobici in base alla forza a scopo di screening.
  • Il test MBC può essere utilizzato per valutare problemi di formulazione in cui il formulatore sospetta che il principio attivo sia "legato" ad altri ingredienti. La teoria è che alcuni dei principi attivi di MBC saranno peggiori per una formula combinata chimicamente con altri ingredienti, quindi non è adatto per uccidere i microrganismi in sospensione.
  • I parametri del test per MBC sono facili da controllare in laboratorio, quindi è possibile effettuare abbastanza facilmente confronti tra vari agenti antimicrobici testati nelle stesse condizioni e i rispettivi effetti su determinati microrganismi.
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