Metodo di test ARE-Nrf2 Luciferase

Chimico / in vitro Con una maggiore affidabilità nei test, i produttori e i formulatori possono ora determinare se una sostanza è un agente sensibilizzante per la pelle senza la necessità di test sugli animali. Ciascuno dei test disponibili riassume alcuni elementi della via degli esiti avversi (AOP) associata a una risposta di sensibilizzazione cutanea nell'uomo. 

Utilizzo di una strategia di test integrata che includa questi approcci per valutare il rischio di rischio di sensibilizzazione cutanea (Sistema mondiale armonizzato di classificazione ed etichettatura delle sostanze chimiche Garantisce la sicurezza e la soddisfazione dei consumatori, nonché la conformità legale.

Panoramica del metodo di analisi ARE-Nrf2 Luciferase

L'ARE-Nrf2 Luciferase Assay è un modello che modella il secondo evento chiave nel percorso di esito negativo della sensibilizzazione cutanea in vitro metodo di prova. Quando la pelle viene esposta ripetutamente a un sensibilizzante cutaneo, un agente sensibilizzante può indurre le cellule della pelle (cioè i cheratinociti) ad attivare un percorso genico protettivo che è collegato alla sensibilizzazione cutanea. Più forte è la risposta dei cheratinociti, maggiore è il potenziale di sensibilità della sostanza.

L'ARE-Nrf2 Luciferase Assay misura l'attivazione di questa via del gene protettivo - la via dell'elemento di risposta antiossidante / elettrofila (ARE) - utilizzando il rilevamento basato sulla luminescenza. Questo test utilizza una linea di cheratinociti modificata contenente un gene della luciferasi sotto il controllo trascrizionale di un promotore strutturale fuso con l'elemento ARE. Quando esposti a un sensibilizzante, vengono attivati ​​geni dipendenti da Nrf2 endogeni. È ben documentato che la luminescenza indotta dalla luciferasi dipende dall'espressione di Nrf2. Un luminometro viene utilizzato per misurare la produzione di luciferasi in risposta ai materiali di prova. Il test ARE-Nrf2 classifica i materiali come positivi per la capacità di sensibilizzazione cutanea se inducono un segnale di luminescenza statisticamente significativo che supera una soglia definita.

Il test ARE-Nrf2 Luciferase è adatto per testare sostanze e miscele multicostituenti ed è più probabile che preveda un potenziale di sensibilizzazione cutanea da basso a moderato rispetto al suo alto potenziale di sensibilizzazione cutanea. Questo test dovrebbe essere utilizzato anche insieme a test aggiuntivi per determinare in modo sicuro la sicurezza e il potenziale di sensibilizzazione cutanea di una sostanza.