Test del sito di inibizione per l'attività antimicrobica

Un Blocking Site Test, chiamato anche Kirby-Bauer Test, è un metodo qualitativo utilizzato per misurare clinicamente la resistenza agli antibiotici e testare industrialmente la capacità dei solidi e dei tessuti di inibire la crescita microbica.

I ricercatori che sviluppano tessuti, superfici e fluidi antimicrobici utilizzano questo test come un modo semplice e veloce per misurare e confrontare i livelli di attività inibitoria.

Con questo metodo, circa un milione di cellule di un singolo ceppo vengono distribuite su una piastra di agar utilizzando un tampone di cotone sterile, quindi incubate in presenza dell'oggetto antimicrobico. 

Se il ceppo batterico o fungino è sensibile all'agente antimicrobico, sulla piastra di agar appare una zona di inibizione, come la piastra di agar a sinistra nella foto sotto. Se è resistente all'agente antimicrobico, nessuna regione sarà visibile come sulla piastra di agar di destra nella foto sotto.

RIEPILOGO DEL TEST DELLA ZONA DI INIBIZIONE

• Un ceppo di batteri o funghi viene coltivato in coltura pura.
• Utilizzando un tampone sterile, una sospensione della coltura pura viene distribuita uniformemente sulla superficie di una piastra di agar sterile.
• L'agente antimicrobico viene applicato al centro della piastra di agar (in modo che l'antimicrobico non si diffonda dal centro). È possibile praticare un foro al centro di un agar per una sostanza liquida.
• La piastra di agar viene incubata per 18-24 ore (o più a lungo se necessario) a una temperatura adatta per il microrganismo in esame.
• Se l'agente antimicrobico fuoriesce dall'oggetto all'agar e quindi esercita un effetto inibitore della crescita, intorno al prodotto in esame appare una zona chiara (zona di inibizione).
• La dimensione della zona di inibizione è spesso correlata al livello di attività antimicrobica riscontrata nel campione o nel prodotto: una zona di inibizione più ampia di solito significa più forte è l'antimicrobico.