Molekuly v roztoku sa separujú podľa svojich interakcií so stacionárnou fázou a detekujú sa pomocou rôznych metód.
Vysokoúčinná kvapalinová chromatografia (HPLC) je analytická technika používaná na separáciu a kvantifikáciu malých molekúl a polymérov.
HPLC je preferovanou metódou na testovanie komplexných zmesí obsahujúcich neprchavé a poloprchavé organické zlúčeniny, ako sú polymérne prísady, aktívne farmaceutické prísady (API) a nečistoty. HPLC používa kvapalnú mobilnú fázu, ktorá preteká kolónou naplnenou fixným prebytkom potiahnutých častíc nosiča, ktoré oddeľujú chemické zlúčeniny prítomné vo vzorke.
Detektory:
HPLC sa môže aplikovať na pevné alebo kvapalné vzorky. Pred HPLC analýzou musia byť vzorky roztopené alebo zriedené alebo extrahované vhodným rozpúšťadlom.
Pred analýzou pomocou HPLC je možné použiť čistenie alebo obohatenie vzorky pomocou extrakcie na pevnej fáze (SPE).
Možno bude potrebné odvodiť cieľovú zlúčeninu (zlúčeniny), aby sa mohli viazať chromofory absorbujúce UV alebo viditeľné svetlo.