Test inhibičného miesta na antimikrobiálnu aktivitu

Test blokujúceho miesta, tiež nazývaný Kirby-Bauerov test, je kvalitatívna metóda používaná na klinické meranie rezistencie na antibiotiká a na priemyselné testovanie schopnosti pevných látok a textílií inhibovať mikrobiálny rast.

Vedci vyvíjajúci antimikrobiálne textílie, povrchy a kvapaliny používajú tento test ako rýchly a ľahký spôsob merania a porovnania úrovní inhibičnej aktivity.

Pri tejto metóde sa približne jeden milión buniek z jedného kmeňa rozloží na agarovú platňu pomocou sterilného vatového tampónu a potom sa inkubuje v prítomnosti antimikrobiálneho objektu. 

Ak je bakteriálny alebo plesňový kmeň citlivý na antimikrobiálne činidlo, na agarovej doštičke sa objaví inhibičná zóna, ako je napríklad agarová doštička vľavo na fotografii nižšie. Ak je rezistentný na antimikrobiálne činidlo, nebudú viditeľné žiadne oblasti ako na pravej agarovej doštičke na fotografii nižšie.

ZHRNUTIE SKÚŠKY INHIBÍČNEJ ZÓNY

• Kmeň baktérií alebo húb sa pestuje v čistej kultúre.
• Pomocou sterilného tampónu sa suspenzia čistej kultúry rovnomerne rozloží na povrch sterilnej agarovej platne.
• Antimikrobiálne činidlo sa nanáša na stred agarovej platne (tak, aby sa antimikrobiálne činidlo nerozšírilo zo stredu). V strede agaru je možné vyvŕtať otvor pre tekutú látku.
• Agarová platňa sa inkubuje 18 až 24 hodín (alebo v prípade potreby aj dlhšie) pri teplote vhodnej pre testovaný mikroorganizmus.
• Ak antimikrobiálne činidlo unikne z objektu na agar a potom vyvolá inhibičný účinok na rast, objaví sa okolo testovaného produktu číra zóna (inhibičná zóna).
• Veľkosť inhibičnej zóny často súvisí s úrovňou antimikrobiálnej aktivity zistenej vo vzorke alebo produkte - väčšia inhibičná zóna zvyčajne znamená silnejšiu antimikrobiálnu látku.