AOAC Kullanım Seyreltme Testi (AOAC 955.14; 955.15; 964.02)

AOAC Kullanım Seyreltme yöntemi, ilk olarak 1955'te geliştirilen dezenfektanların etkinliğini test etmek için bir yöntemdir. Çok sayıda revizyonu boyunca, sert yüzeyler için sıvı ve seyreltilebilir sıvı dezenfektanların değerlendirilmesi için standart haline gelmiştir.

Özellikle, bu yöntem ABD EPA tarafından dezenfektan iddiasının doğrulanması için gerekli yöntem olarak belirtilmiştir. Kullanım Seyreltme yöntemi kısaca paslanmaz çelik taşıyıcıları bakterilere batırarak, onları dezenfektanla işlemden geçirerek ve son olarak taşıyıcıları hala hayatta kalan bakteri olup olmadığını belirlemek için büyüme suyuna yerleştirerek gerçekleştirilir. Bu, yöntemi kalitatif bir yöntem haline getirir, yani sonuçların bakterileri numaralandırmaktan ziyade bakterilerin büyüyüp büyümediğine göre belirlendiği anlamına gelir.

Yöntemin en son revizyonlarından biri, endüstri üyeleri ve EPA tarafından birkaç yıllık çalışmanın sonucu, Staphylococcus aureus ve Pseudomonas aeruginosa için performans standardının düşürülmesi ve testin başarılı / başarısız tespitini daha güvenilir hale getirmesiydi. Bu aynı zamanda dezenfektan geliştiricilerin zevkine göre testi geçmeyi kolaylaştırma avantajına da sahipti.

Performans standardındaki değişikliğin yanı sıra EPA, bazı mikroorganizmalar için farklı test ürünü partilerinin farklı günlerde test edilmesi şartını da ekledi.

Not: Aşağıdaki bilgiler yalnızca eğitim amaçlı sunulmuştur. Güncel, ayrıntılı AOAC Yöntemleri AOAC'tan elde edilebilir.

TEST YÖNTEMİ VE ÖNEMLİ PARAMETRELERİN ÖZETİ

• Tek bir bakteri türünün 48 saatlik bir kültürü, penisilindirler adı verilen bir dizi küçük, silindirik, paslanmaz çelik test yüzeyinde (yaygın olarak "taşıyıcılar" olarak anılır) kurutulur.
• Ürün "tek aşamalı" bir temizleyici / dezenfektan olarak pazarlanacaksa, organik toprak, testin başlamasından önce kültüre eklenir.
• Taşıyıcılar (10, 30 veya 60) bakteri kültürüne batırılır.
• İlk ürün kaydı için test, test ürünü lotu başına mikroorganizma başına 60 taşıyıcıyla test edilmesini gerektirir. LCL'de veya altında üretilen üç lot ürün, mikroorganizma başına test edilmelidir.
• "Tamamlayıcı organizmalar" için test, test ürününün lotu başına mikroorganizma başına 10 taşıyıcıyla test edilmesini gerektirir. LCL'de veya altında üretilen iki lot ürün, mikroorganizma başına test edilmelidir.
• Ar-Ge amaçlı GLP olmayan ekranlar da 10, 30 veya 60 taşıyıcı ile gerçekleştirilebilir.
• Taşıyıcılar kurutuldu.
• Ön test taşıyıcı mikrobiyal konsantrasyonlarını belirlemek için testin başlamasından önce üç taşıyıcı numaralandırılır.
• Her kuru, kontamine test taşıyıcı, ayrı ayrı 10 mL dezenfektanla doldurulmuş bir test tüpüne aktarılır ve burada belirtilen temas süresi boyunca inkübe edilir.
• Testte kullanılan temas süresi, EPA'nın ürün etiketinde izin verdiği temas süresidir.
• Temas süresi geçtikten sonra, muamele edilen test taşıyıcıları, sıvı nötrleştirici / büyüme ortamı içeren test tüplerine ayrı ayrı aktarılır.
• Test sonrası taşıyıcı mikrobiyal konsantrasyonları belirlemek için testin tamamlanmasının hemen ardından üç taşıyıcı numaralandırılır.
• Muamele edilen test yüzeyleri, 48 saat boyunca nötralize edici büyüme ortamında inkübe edilir.
• İnkübasyondan sonra, hedef mikroorganizmanın üremesini gösteren tüplerin sayısı kaydedilir.
• İçin Salmonella enterica "geçiş" 60 taşıyıcı testi, yüzeylerin en az 59, test edilen her parti için, tam bir dezenfeksiyon göstermek zorundadır.
• İçin Pseudomonas aeruginosa "geçiş" 60 taşıyıcı testi, yüzeylerin en az 54, test edilen her parti için, tam bir dezenfeksiyon göstermek zorundadır.
• İçin Staphylococcus aureus "geçiş" 60 taşıyıcı testi, yüzeylerin en az 57, test edilen her parti için, tam bir dezenfeksiyon göstermek zorundadır.
• 10 taşıyıcı testini "geçmek" için tüm test yüzeylerinde tam dezenfeksiyon gerçekleştirilmelidir.

AOAC KULLANIM SEYRELTME TEST YÖNTEMİNİN GÜÇLÜ YÖNLERİ

• AOAC Kullanım-Seyreltme Testi, ABD'de satılan seyreltilebilir dezenfektanların tescili ile bağlantılı olarak veri sunumu için EPA tarafından onaylanmıştır. Performans standardı ayarlandığına göre, Kullanım-Seyreltme Yöntemi, sıvıları dezenfektan olarak kaydetmek için kullanılabilen diğer yöntem olan AOAC Antiseptik Sprey Ürünlerini Dezenfektan olarak kaydetmek için kullanılabilen çoğu ürün için muhtemelen daha kolaydır  .
• AOAC Kullanım Seyreltme Testi, dezenfektanlar için "yüksek seviyeli" bir testtir, yani bir antimikrobiyal çözeltinin, testi geçmesi için nispeten kısa bir zaman aralığında kayda değer biyosidal aktiviteye sahip olması gerektiği anlamına gelir.