ARE-Nrf2 Lusiferaz Test Yöntemi

Chemico / in vitro testlerde güvenilirliğin geliştirilmesiyle , üreticiler ve formülatörler artık bir maddenin deri hassaslaştırıcı bir ajan olup olmadığını hayvan testine gerek kalmadan belirleyebiliyor. Mevcut tahlillerin her biri, insanlarda bir deri hassaslaştırma tepkisi ile ilişkili olumsuz sonuç yolunun (AOP) bazı unsurlarını özetlemektedir. 

Cilt hassaslaşması tehlike riskini belirlemek için bu yaklaşımları içeren entegre bir test stratejisi kullanmak (Kimyasalların Sınıflandırılması ve Etiketlenmesine İlişkin Küresel Uyumlaştırılmış Sistem tarafından ana hatlarıyla belirtildiği gibi ), yasal uyumluluğun yanı sıra tüketici güvenliği ve memnuniyetini de sağlar.

ARE-Nrf2 Lusiferaz Test Yöntemine Genel Bakış

ARE-Nrf2 Lusiferaz Testi, cilt hassaslaşması olumsuz sonuç yolundaki ikinci anahtar olayı modelleyen bir in vitro test yöntemidir. Cilt bir cilt hassaslaştırıcısına tekrar tekrar maruz kaldığında, hassaslaştırıcı bir madde cilt hücrelerinin (yani keratinositlerin) cilt hassaslaşmasına bağlı koruyucu bir gen yolunu etkinleştirmesine neden olabilir. Keratinosit tepkisi ne kadar güçlü olursa, maddenin duyarlılık potansiyeli o kadar büyük olur.

ARE-Nrf2 Lusiferaz Testi, bu koruyucu gen yolunun - antioksidan / elektrofil yanıt öğesi (ARE) yolunun - aktivasyonunu lüminesans tabanlı saptamayı kullanarak ölçer. Bu tahlil, ARE elementi ile kaynaşmış bir yapısal promoterin transkripsiyonel kontrolü altında bir lusiferaz geni içeren modifiye edilmiş bir keratinosit çizgisini kullanır. Bir duyarlılaştırıcıya maruz bırakıldığında, endojen Nrf2'ye bağımlı genler aktive olur. Lusiferaz kaynaklı lüminesansın Nrf2 ifadesine bağlı olduğu iyi belgelenmiştir. Test malzemelerine yanıt olarak lusiferaz çıktısını ölçmek için bir Luminometre kullanılır. ARE-Nrf2 Testi, malzemeleri, tanımlanmış bir eşiği aşan istatistiksel olarak önemli bir ışıldama sinyali indüklerlerse cilt hassaslaştırma kapasitesi açısından pozitif olarak sınıflandırır.

ARE-Nrf2 Lusiferaz Testi, çok bileşenli maddeleri ve karışımları test etmek için uygundur ve yüksek cilt hassaslaştırma potansiyelinin aksine düşük ila orta derecede cilt hassasiyeti potansiyelini tahmin etme olasılığı daha yüksektir. Bu test ayrıca bir maddenin güvenliğini ve cilt hassaslaştırma potansiyelini güvenle belirlemek için ek testlerle birlikte kullanılmalıdır.