Bu testte, test öğesinden salınan sızabilir maddelerin sitotoksisitesi, kontrollere kıyasla test öğesi ekstresinin çeşitli konsantrasyonları ile muameleden sonra koloni oluşturma yeteneği ile değerlendirilir.
% 50 koloni oluşumunu azaltır seyreltme (IC 50 ) özler (%) dilüsyonları karşı oranları (%) oluşturan görece koloni çizilerek belirlenebilir.
Taze kültür ortamı ile işlenen kültürlerde oluşan ortalama koloni sayısı, hücrelerin mutlak koloni oluşturma kabiliyetini temsil eder ve bu, kültür plakalarında geçiş ve tohumlamadan sonra hücrelerin hayatta kalma oranını yansıtır (% 100 kontrol).
Test Öğesi Kabul Kriterleri:
Protokol |
|
Hücre çizgisi |
V79 hücreleri (ATCC, CCL-93). |
Analiz |
Kültürlerde oluşan ortalama koloni sayısı, hücrelerin mutlak koloni oluşturma yeteneğini temsil eder ve bu, test öğesi ile tedavi edildikten sonra hayatta kalma oranını yansıtır. |
Konsantrasyonlar |
6 konsantrasyon test özütü |
Ekstraksiyon süresi |
37 ± 1 ° C'de 24 saat |
Kuluçka süresi |
37 ± 1 ° C'de 6-7 gün |
Kalite kontrolleri |
% 100 kontrol: Taze MEM% 10 FBS Çözücü kontrolü: MEM% 10 FBS Negatif kontrol: MEM% 10 FBS'de ekstrakte edilmiş yüksek yoğunluklu polietilen Pozitif kontroller: MEM% 10 FBS'de ekstrakte edilmiş ZDEC- ve ZDBC- poliüretan film |
Veri teslimi |
Koloni Oluşturma Yeteneği |
Olumlu tahmin |
|